Die FDA hat kürzlich überarbeitete Durchsetzungsrichtlinien bezüglich der Zulassung von molekularen Influenza- und RSV-Tests während des COVID-19-Notfalls im Bereich der öffentlichen Gesundheit veröffentlicht. Da viele Influenza- und RSV-Tests die gleichen Inhaltsstoffe verwenden wie diejenigen, die für die molekulare Analyse von SARS CoV-2 verwendet werden, wurde diese Richtlinie erstellt, um bei Reagenzienknappheit während der Grippesaison zu helfen. Diese Richtlinie wird dazu beitragen, den Zugang zu von der FDA zugelassenen Molekulartests zum Nachweis und zur Charakterisierung von Influenzaviren zu erweitern, einschließlich solcher, die RSV identifizieren.

Darüber hinaus hat CAIVD die wichtigsten Inhalte der FDA Virtual Town Hall Series – Effective Immediate Release of Guidance on Diagnostic Testing for Coronavirus (COVID-19) (Q&A format) zur Freude der Leser übersetzt und destilliert. Die FDA hat etwa 100 Personen, die an der direkten Überprüfung von EUA und Pre-EUA beteiligt sind, und hinter ihnen steht eine große Anzahl von Mitarbeitern, die auf verschiedene Weise helfen. Dieses Q&A konzentriert sich auf technische Fragen im Zusammenhang mit der Entwicklung und Validierung von SARS-CoV-2-Tests bei Notfällen im Bereich der öffentlichen Gesundheit. Ein kurzes Update wurde von Dr. Timothy Stenzel, Direktor, Büro für In-vitro-Diagnostik und radiologische Gesundheit, und stellvertretender Direktor, Büro für In-vitro-Diagnostik und radiologische Gesundheit, Produktbewertungs- und Qualitätsabteilung des CDRH, vorgestellt.

Timothy Stenzel: Seit dieser Woche haben wir eine Reihe von EUA-Genehmigungen genehmigt, eine der spezifischeren ist, dass wir den ersten Antigen-Streifentest genehmigt haben. Es ist ein normaler Teststreifen, der in das Reagenzglas gegeben wird und für Point-of-Care-Tests zugelassen ist. Viele Menschen interessieren sich für diesen einfachen und kostengünstigen Test, und für diesen Antigen-Streifentest ist nicht einmal eine Kartusche erforderlich.

Dies ist der Quidel QuickVue SARS-Test, und wie Abbotts BinaxNow ist es ein sehr einfacher Antigentest, der keine Ausrüstung erfordert. Wir denken, dass es insofern einzigartig ist, als es die Kosten für das Erhalten von Testergebnissen erheblich senken kann, sodass es wie Abbotts BinaxNOW in Massenproduktion hergestellt werden kann.

Es gibt viele andere großartige Antigen-Testprodukte da draußen. Im Allgemeinen priorisieren wir Genehmigungen für Anwendungen, die erhebliche Auswirkungen auf die öffentliche Gesundheit haben, wie z. Wir betrachten hauptsächlich diagnostische Tests, konzentrieren uns aber auch auf serologische Tests.

Ein weiteres Thema, das ich ansprechen möchte, ist die neue Coronavirus-Mutation. Varianten des Coronavirus in Großbritannien sind auch in den USA zu einem Problem geworden, wo wir einige bestätigte Fälle gesehen haben. Die südafrikanische Variante hat einige überlappende Mutationen mit der britischen Variante, aber es gibt auch deutliche Unterschiede.

Beide Varianten scheinen hochinfektiös zu sein, da das Virus mutiert und die Bindung an den Rezeptor verstärkt. Dafür gibt es Hinweise, von denen einige möglicherweise eine höhere Viruslast haben und dann stärker an die Rezeptoren binden, um eine größere Wirkung zu erzielen. Daher ist es wichtig zu wissen, welche Variantenstämme im Umlauf sind. Wir interessieren uns für sequenzierungsbasierte Assays, die vollständige Genomsequenzen liefern. Und wir haben mindestens eines dieser Reagenzien lizenziert – Illumina-Kits. Es ist erwähnenswert, dass es ermächtigt wurde, bevor wir die Bedeutung der Variation verstanden haben.

Eine andere Sache, die die FDA getan hat, besteht darin, alle Antragsteller, insbesondere diejenigen von Molekulartests, regelmäßig zu verpflichten, die Sequenz bekannter Varianten während des Zulassungsprozesses mindestens zweimal zu überprüfen und ihre Primer über diese Varianten in der bekannten Datenbank und alle damit verbundenen Probleme zu klären können beim Sondendesign auftreten.

Darüber hinaus verfügt die FDA über bioinformatische Analysemöglichkeiten. Wir haben eine Liste aller von der EUA zugelassenen molekularen Primer und Sonden. Wir haben Sequenzierungsdatenbanken abgefragt, um festzustellen, ob es Mutationen gibt, die die Testleistung beeinträchtigen könnten. Wir haben Mutantenstämme analysiert, die in Großbritannien und Südafrika vorkommen. Wir haben dies auch schon früher für alle Varianten getan, die in der Datenbank erscheinen und 5 % oder mehr der Sequenz in der Datenbank ausmachen.

Mindestens ein Test der britischen neuen Coronavirus-Variante, über den wir heute gesprochen haben, wurde öffentlich als Thermofisher Attack Path Assay mit der Deletion des S-Gens erwähnt. Aufgrund der S-Gen-Deletion untersuchten wir viele Varianten und Sequenzen in der US-Datenbank. Bisher haben die meisten nicht die Eigenschaften der britischen Variante. Derzeit gibt es in den Vereinigten Staaten nur eine Untergruppe – die Deletion des S-Gens von Thermofisher. Wir glauben, dass etwa 5 % der Thermofisher-positiven Patienten S-Gen-Deletionen aufweisen. Wir glauben jedoch, dass bis heute die überwiegende Mehrheit die britische Variante nicht trägt. Daher empfehlen wir derzeit zumindest die Sequenzüberprüfung von S-Gen-Deletionsproben, und die von der EUA autorisierte Sequenzanalyse von Illumina kann diese Anforderung erfüllen.

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F1: Welcher infektiositätsbezogene CT-Grenzwert ist für Berichtszwecke geeignet, wenn ein molekularer Test als Komparator für Antigen-Schnelltests verwendet wird?

A: Wir haben keine CT-Cutoffs oder irgendeine Art von infektiösem Cutoff verwendet, da CTs in Wirklichkeit stark variieren. Für Antigen-Schnelltests fanden wir in den ersten fünf Tagen nach Beginn der Symptome einen CT von bis zu 40. Die genaue Ursache steht noch nicht fest. Aber wir haben sehr deutlich gesehen, dass es in den ersten fünf bis sieben Tagen nach Beginn der Symptome einige hohe CT-Ergebnisse gab. Daher halten wir es für wichtig, dass wir die tatsächliche Leistung des Antigentests kennen, wenn Symptome auftreten.

Daher empfehlen wir den direkten Antigentest. Die meisten Tests sind für den symptomatischen Zeitraum von fünf bis sieben Tagen zugelassen. Wir wollen wissen, wie hoch die Erkennungsrate bei Patienten ist, die sich einem Antigentest unterzogen haben und als positiv auf Covid-19 diagnostiziert wurden.

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F2: Wenn die klinische Validierung als Screening-Test verwendet wird, wie hoch ist die empfohlene Mindestanzahl positiver und negativer PCR-Fälle?

A: Wenn Sie ein asymptomatisches Screening durchführen und dies Ihre erste und einzige Studie ist, dann brauchen Sie meiner Meinung nach 30 positive Fälle. Wenn Sie es zu autorisierten Inspektionen hinzufügen oder mit dem ersten EUA-Autorisierungszeitraum synchronisieren möchten. Wir glauben, dass das Minimum von mindestens 10 positiven Fällen asymptomatischer Patienten vor der Vermarktung oder vor der Zulassung abhängt.

Wenn Sie sich für einen Antigentest entscheiden, wird empfohlen, dass Sie eine Studie durchführen, um das Beste aus dem herauszuholen, was Menschen ohne Symptome wirklich tun. Wie ich bereits sagte, erreichen die Antigentests ihren Höhepunkt in den ersten fünf bis sieben Tagen der Symptome. Viruslevel und okkulte Spikes in ihnen erreichen in der Regel während dieser Zeit ihren Höhepunkt. Es kann etwas früher sein, aber normalerweise nicht verzögert. Nach einer Woche Virusverbergung ließ die Antigenerkennungsleistung nach. Während ein guter molekularer Test nach 14 Tagen noch positiv sein kann, entwickeln einige Fälle Symptome, die über den Rahmen symptomatischer Studien hinausgehen.

Daher besteht ein optimales Studiendesign darin, eine Reihe von seriellen Assays zu verknüpfen, die Ihnen die besten Chancen bieten, die überlegene Leistung von Antigen-Assays zu demonstrieren. Screenen Sie mindestens wöchentlich mit einem molekularen Vergleichspräparat, das als dokumentiertes Vergleichspräparat für asymptomatische Studien verwendet werden kann. Auf diese Weise können Sie Ihre Datenbank anreichern, während Sie warten, bis jemand ein positives Screening bestätigt. Kontaktieren Sie positiv getestete Personen, um zu sehen, ob sie sich für den neuen Test testen lassen möchten. Es ist wünschenswert, mindestens die gleiche Anzahl von Negativen zu verwenden, um die Zuverlässigkeit sicherzustellen. Vielleicht ist dies der beste Weg, asymptomatische Virusspiegel anzureichern, um hoffentlich bessere Antigenleistungstests zu sehen.

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Q3: Welche Priorität hat die EUA-Zulassung für verschiedene Tests?

A: POCT-Tests, Home-Tests, Home-Sampling, hauptsächlich konzentriert auf diagnostische Tests, nämlich molekulare und antigene Tests. Aber auch serologische Tests werden priorisiert. Darauf folgen zentrale Labortests mit hohem Durchsatz, die dazu beitragen, die Bearbeitungszeit von Testergebnissen auf automatisierten Plattformen oder automatisierten Systemen zu verkürzen. Das sind Prioritäten.

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F4: Was die Serologie betrifft, was sagt die FDA angesichts der derzeit durchgeführten Impfungen zu serologischen Tests bei geimpften Personen?

A: Impfstoffe werden vom Center for Biologics Evaluation and Research (CBER) überprüft, und Fragen müssen zur Beantwortung an das Zentrum gesendet werden. Die Serologie kann auf der Grundlage bekannter Daten auf verschiedene Weise vorhergesagt werden, was für die Überprüfung jeder impfstoffbezogenen Einreichung wichtig ist. Es gibt kein Verbot für seine Bewertung in den verschiedenen serologischen Tests, die von lizenzierten Klinikern verwendet werden. Es muss darauf geachtet werden, dass derzeit keine serologischen Tests von der FDA für irgendeinen Zweck zugelassen sind, sei es um festzustellen, ob ein Impfstoff erforderlich ist, oder um festzustellen, ob ein Impfstoff wirksam ist oder ob eine Immunität festgestellt wurde. Auch serologische Tests sind für Impfanwendungen nicht zugelassen. Die FDA hat semiquantitative serologische Tests und neutralisierende serologische Reagenzien für Antikörper zugelassen.

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F5: Wie werden serologische Tests bei geimpften Personen durchgeführt und gibt es falsch positive Ergebnisse? Wenn jemand geimpft wurde, kann man erkennen, dass Antikörper gebildet wurden?

A: Derzeit sind keine derartigen Reagenzien zugelassen. Die Entwicklung von Impfstoff-Antikörpern kann der Entwicklung tatsächlicher neuer Antikörper gegen Kroneninfektionen sehr ähnlich sein. Es ist ein sehr wichtiger Test und erfordert spezifische Anforderungen. Die FDA wird das Design prüfen, erfordert jedoch noch mehrere Überlegungen.

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F6: Was ist die Empfehlung der FDA für interne Standards für Antigentests in Bezug auf die Verwendung von Qualitätskontrollen?

A: Es gibt einen internen Standard, um die Qualität der Probe zu beurteilen, aber dies ist keine Voraussetzung für die EUA-Zulassung. Die einzige Anforderung oder Empfehlung für einen solchen internen Standard war bisher die Probenentnahme zu Hause, und wir wissen nicht, ob Patienten selbst ausreichend gute Proben für die Analyse ohne interne Standardkontrolle gesammelt haben. Die FDA hat einige Zulassungen mit internen Standardprogrammen aktualisiert, die Leistung in Heimtests bewertet, Tausende von Daten überprüft und fordert in einigen Fällen keine internen Standards mehr. Aber jetzt mit neuen F&D-Einrichtungen und neuen Haushaltssammlungen würden wir gerne diese Daten sehen.

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F7: Können Sie eine akzeptable Anreicherungsstrategie für schnelle Antigentests kommentieren, insbesondere das Screening aller Personen, die in ein COVID-Testzentrum kommen, auf Symptome einer COVID-19-Infektion?

Wir suchen positive Fälle, einige mit Symptomen und andere ohne Symptome. Um zu versuchen, einen symptompositiven statt asymptomatischen Anspruch zu erhalten, wollten wir Personen untersuchen, die innerhalb der letzten 8 Tage Symptome hatten oder die vor 8 Tagen begannen, Symptome zu zeigen.

A: Ich denke nicht, dass dies ein besonders gutes Studiendesign ist. Aufgrund der derzeit hohen Positivrate können mindestens 30 positive Ergebnisse erzielt werden, solange symptomatische Patienten untersucht werden. Wir haben eine große Flexibilität bei der asymptomatischen Erkennung. Um beim Antigen-Nachweis gute Arbeit zu leisten, sollte es sich um eine Gruppe kontinuierlicher Nachweise handeln, die die beste Gelegenheit für den Antigen-Nachweis bieten und ihre hervorragende Leistung in den ersten 5-7 Tagen der Virusverdeckung unter Beweis stellen. Leistung. Wenn Sie nachfassen möchten, müssen Sie einen Pre-EUA-Antrag zur Überprüfung einreichen, dies wird jedoch nicht empfohlen.

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F8: Die CDC hat zugestimmt, einige Tests an britischen Mutanten des neuen Coronavirus im Vergleich zu bestehenden von der EUA genehmigten Tests durchzuführen. Gilt das auch für Entwickler, die Antigentests entwickeln?

A: Ich denke, der richtige Zeitpunkt ist, nachdem die Analyse abgeschlossen wurde. Sie können zur Bewertung auch selbst Pseudoviren konstruieren, da möglicherweise UK-positive mutierte Lebendviren und/oder bestrahlte oder Häm-aktivierte Viren in der BEI-Bibliothek vorhanden sind. Aber ich denke nicht, dass es notwendig ist, CDC früh in der Entwicklung zu überlasten.

Es ist wichtig, dass wir hoffen, dass alle Antigentests nicht betroffen sind. Ich denke, wir könnten mit dem ersten Test, den wir gemacht haben, eine gute Richtung bekommen. Typischerweise zielen Antigen-Assays auf das N-Gen ab, das in mancher Hinsicht viel stärker konserviert sein kann als das spec-Protein.

Aber sobald Sie es gesperrt und bereit zum Commit haben, werde ich anfangen, den Fortschritt zu überprüfen. Denn in diesem Moment wäre es auch für uns bei der FDA eine große Hilfe, die Reagenzien, die die Tests für die britische Variante auswerten, sofort verstehen und darauf reagieren zu können. Wir wollen den Produktentwicklungsprozess mit Ihnen begleiten.

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F9: Wenn wir die Erlaubnis haben, ein klinisches Validierungsstudiendesign durchzuführen, gilt dies auch für einen 510(k)?

A: Nachdem der erste De Novo in der molekularen oder einer anderen relevanten Klassifizierung genehmigt wurde, wird jeder nachfolgende Assay einem 510(k) unterzogen. Für diejenigen Entwickler, die ihre Transformationsanforderungen verstehen möchten, entwerfen wir einen Leitfaden, aber die spezifischen Details zu allen EUA-Produkten werden im ersten Entwurf möglicherweise nicht vollständig abgedeckt.

Also haben wir das Team gebeten, einige Informationen zu entwerfen, die mit den Entwicklern geteilt werden könnten. Erstens unterscheidet sich SARS-CoV-2 von Standardantigenen bei anderen Infektionskrankheiten durch den serologischen und/oder molekularen Nachweis von respiratorischen Infektionsantigenen. Unser Feedback wird sich also darauf konzentrieren, wie unterschiedlich Covid und unsere Reaktion sind. Wir bitten Sie dringend, unsere Zusammenfassung der jüngsten Entscheidungen für De Novos und 510(k)s zu lesen, die alle häufig gestellten Fragen zu speziellen Kontrollen im Zusammenhang mit Tests auf Atemwegsviren enthält.

Ich glaube nicht, dass es eilig ist, EUA in 510 (k) umzuwandeln. Denn im Moment haben wir viele EUA-Anträge zu bearbeiten und jede Woche viele neue Anträge. Daher wird unser Fokus jetzt noch hauptsächlich auf der Zulassung der EUA liegen. Selbst wenn dies zu Ende geht, bieten die Richtlinien, die wir entwerfen, eine sehr vernünftige Übergangszeit, sodass wir nicht glauben, dass während des Übergangs unangemessene Dinge passieren werden.

Aber ich weiß sehr wohl, dass wir viele Transformationen verlangen werden, also ist es ratsam, dass alle Entwickler anfangen, über diese Transformationen nachzudenken. Wenn Ihnen der Übergang an einem wichtigen Übergangspunkt wichtig ist, ist es möglich, während der aktuellen COVID-19-Pandemie Proben für die translationale Forschung zu sammeln, um den Übergang Ihrer EUA zu einem 510(k) vorzubereiten.

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F10: Haben Sie Hinweise oder Informationen, dass CDC-Primer von der sich ausbreitenden Mutation betroffen sein könnten?

A: Ja. Sobald wir die potenziellen Auswirkungen auf molekulare, antigene oder serologische Tests identifiziert haben, werden wir diese Informationen so schnell wie möglich veröffentlichen. Die Primer- und Sondensequenzen für die CDC-Analyse wurden veröffentlicht, und Sie können Mutationen und deren Auswirkungen auf diese Primer und Sonden anzeigen und verstehen.

Originalquelle

FDA Virtual Town Hall-Reihe– Sofort gültige Anleitung zu Diagnosetests für das Coronavirus (COVID-19).

Source: FDA official website